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      瓊脂糖電泳常見問題及解決方案
      更新時(shí)間:2025-06-10瀏覽:855次

        瓊脂糖電泳常見問題及解決方案

        以下是瓊脂糖電泳常見問題及解決方案的總結(jié):

        一、?條帶異常問題?

        條帶模糊/拖尾?

        原因?:DNA降解、緩沖液陳舊或上樣過量

        解決?:

        使用新鮮緩沖液(TAE/TBE),避免反復(fù)使用;

        減少上樣量(每孔≤10μL),避免超載;

        檢查核酸酶污染,確保樣品純度。

        條帶扭曲或"笑臉型"?

        原因?:電場(chǎng)不均、梳子拔出不當(dāng)或膠體凝固不均


        解決?:

        預(yù)電泳5分鐘(低電壓)平衡電場(chǎng);

        垂直緩慢拔梳子,避免孔變形。

        Marker條帶不清晰?

        原因?:膠濃度不合適或染料分布不均

        解決?:

        調(diào)整膠濃度(0.8%-2%按片段大小選擇);

        改用泡染法(如GelRed后染色)。

        二、?電泳過程問題?

        DNA遷移異常?

        電壓過高?:>10V/cm易致條帶擴(kuò)散,建議5-8V/cm;

        緩沖液錯(cuò)誤?:避免用自來水或高濃度母液,需1×TAE/TBE。

        凝膠漂浮或緩沖液不流動(dòng)?

        原因?:冷卻泵故障或密封不良

        解決?:檢查設(shè)備密封性,調(diào)整蠕動(dòng)泵速度。

        三、?其他關(guān)鍵問題?

        無條帶顯示?

        原因?:電極接觸不良、DNA未染色或樣品降解

        解決?:檢查電極連接,確認(rèn)染料活性。

        背景熒光高?

        原因?:膠體雜質(zhì)或紫外曝光過久

        解決?:過濾瓊脂糖溶液,縮短紫外觀察時(shí)間。

        拖尾現(xiàn)象?

        原因?:DNA結(jié)合蛋白或鹽分污染

        解決?:酚/氯仿純化樣品,乙醇沉淀去鹽。

        四、?預(yù)防性建議?

        制膠?:微波加熱瓊脂糖至透明,冷卻至60℃再加染料;

        維護(hù)?:每次使用后蒸餾水沖洗電極,避免鹽結(jié)晶腐蝕;

        保存?:Marker需-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。

        通過規(guī)范操作與針對(duì)性調(diào)整,可顯著提升電泳結(jié)果質(zhì)量。

        BS-300   基礎(chǔ)性電泳儀電源

        BS-600C  通用型電泳儀電源

        BS-mini01  垂直電泳槽(雙板)

        BS-mini04  垂直電泳槽(四板)

        BS-ZY03   轉(zhuǎn)印電泳槽(WB雙板和鉑樂通用)

        BS-ZY04   轉(zhuǎn)印電泳槽 (WB四板)

        BS-sub02  瓊脂糖電泳槽

        注:以上資料僅供參考,具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。

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